在免疫測定領(lǐng)域，夾心法作為一種經(jīng)典且高效的檢測方法，憑借其獨(dú)特的原理和顯著的優(yōu)勢，在生物樣本分析中發(fā)揮著重要作用。根據(jù)檢測物質(zhì)的不同，夾心法可分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法，這兩種方法在臨床診斷、科研檢測等多個(gè)場景中廣泛應(yīng)用。了解它們的原理、優(yōu)缺點(diǎn)，有助于我們更好地選擇合適的檢測方法，提升檢測的準(zhǔn)確性和可靠性。
一、雙抗體夾心法
1、反應(yīng)原理
雙抗體夾心法以抗原為檢測目標(biāo)。在檢測過程中，首先將捕獲抗體固定在固相載體上，當(dāng)含有待測抗原的樣本加入后，樣本中的待測抗原會(huì)與固相載體上的捕獲抗體發(fā)生特異性結(jié)合，形成“固相載體 - 捕獲抗體 - 待測抗原”復(fù)合物。隨后，通過清洗步驟去除未結(jié)合的雜質(zhì)，再加入標(biāo)記抗體。標(biāo)記抗體同樣能夠特異性地識別并結(jié)合待測抗原的另一個(gè)抗原表位，從而形成“固相載體 - 捕獲抗體 - 待測抗原 - 標(biāo)記抗體”雙抗體夾心復(fù)合物。最終，通過檢測標(biāo)記抗體所攜帶的信號，如酶催化底物產(chǎn)生的顯色信號或發(fā)光物質(zhì)發(fā)出的光信號，且該檢測信號與樣本中待測抗原的量成正相關(guān)，以此實(shí)現(xiàn)對待測抗原的定量分析。
2、應(yīng)用場景與優(yōu)勢
雙抗體夾心法在傳染病抗原檢測、腫瘤標(biāo)志物檢測等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。由于使用了兩種不同的特異性抗體，該方法具有極高的靈敏度，能夠檢測出樣本中微量的抗原。其特異性也非常出色，兩種抗體的雙重識別機(jī)制有效降低了非特異性結(jié)合的概率，減少了假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。此外，雙抗體夾心法的信號值和抗原濃度值之間呈現(xiàn)良好的比例關(guān)系，使得檢測曲線寬、線性好，便于準(zhǔn)確地進(jìn)行定量分析。
二、雙抗原夾心法
1、反應(yīng)原理：雙抗原夾心法主要用于檢測樣本中的抗體。其原理是將捕獲抗原固定在固相載體上，當(dāng)樣本中的待測抗體加入后，待測抗體與固相載體上的捕獲抗原發(fā)生特異性結(jié)合，形成“固相載體 - 捕獲抗原 - 待測抗體”復(fù)合物。經(jīng)過清洗去除未結(jié)合的物質(zhì)后，再加入標(biāo)記抗原。標(biāo)記抗原同樣能夠特異性地與待測抗體結(jié)合，從而形成“固相載體 - 捕獲抗原 - 待測抗體 - 標(biāo)記抗原”雙抗原夾心復(fù)合物。通過檢測標(biāo)記抗原所產(chǎn)生的信號強(qiáng)度，即可得知樣本中待測抗體的含量，且檢測信號與樣本中待測抗體的量成正相關(guān)。
2、適用范圍與特點(diǎn)：雙抗原夾心法在自身免疫性疾病抗體檢測、傳染病抗體篩查等方面發(fā)揮著重要作用。與雙抗體夾心法類似，它也具有較高的靈敏度和特異性，能夠準(zhǔn)確檢測出樣本中的抗體。由于檢測的是總抗體，在某些情況下，這一特點(diǎn)可以快速判斷樣本中是否存在抗體，無需區(qū)分抗體的具體種類。然而，當(dāng)需要對抗體亞型進(jìn)行區(qū)分時(shí)，這一特點(diǎn)則可能成為限制因素。
三、雙抗體夾心法與雙抗原夾心法的優(yōu)缺點(diǎn)
1、共同優(yōu)點(diǎn)：兩種方法均利用了抗體或抗原的特異性結(jié)合，靈敏度高，能夠檢測到低濃度的目標(biāo)物；使用兩種不同的抗體或抗原，有效降低了非特異性結(jié)合，特異性好；信號值和濃度值的比例關(guān)系良好，檢測曲線寬、線性好，便于定量分析；反應(yīng)原理簡單，操作相對容易，易于在實(shí)驗(yàn)室中實(shí)施。
2、共同缺點(diǎn)：它們都易受類風(fēng)濕因子（RF）、異嗜性抗體、人抗動(dòng)物抗體等干擾物質(zhì)的影響。為解決這一問題，通常需要加入阻斷劑或者對原料進(jìn)行改造，這無疑增加了檢測成本。當(dāng)使用夾心法檢測抗體時(shí)，只能檢測樣本中的總抗體，無法對抗體的種類進(jìn)行區(qū)分。
在免疫測定夾心法的應(yīng)用過程中，優(yōu)質(zhì)的原料是確保檢測準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵。湖北新德晟材料科技有限公司專注于體外診斷試劑原料的研發(fā)與生產(chǎn)，為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法提供了高品質(zhì)的原料支持。憑借卓越的產(chǎn)品質(zhì)量和專業(yè)的技術(shù)服務(wù)，湖北新德晟成為眾多實(shí)驗(yàn)室和企業(yè)在免疫測定領(lǐng)域值得信賴的合作伙伴。如果您有采購需要，歡迎隨時(shí)聯(lián)系！
