酶聯(lián)免疫分析中辣根過氧化物酶HRP有著多種底物,其中新型Trinder’s試劑時靈敏度高、干擾少的一類顯色底物,這類試劑有包括TOOS、ALPS、MAOS等十多種類型,它們之間有什么區(qū)別呢?
新型Trinder’s試劑是在傳統(tǒng)色原底物苯酚或苯胺的基礎上發(fā)展改進而來的,在傳統(tǒng)色原的基礎上,進行一些官能團的取代、修飾等,使色原的水溶性、試劑相容性、穩(wěn)定性、顯色產物的最大吸收波長改變等,德晟科技重點開發(fā)了十種色原底物新型Trinder’s試劑。
新型Trinder's試劑TOOS、ALPS、MAOS區(qū)別
我們知道,Trinder’s試劑的檢測原理都是利用其參與反應后生成特定吸收波長的顯色產物,再用分光光度法測量在某一特定最大吸收波長處的吸光度變化,從而分析待測物的濃度的。那么不同色原底物的顏色反應產物最大吸收波長和吸光強度就決定了色原底物的性能差異。
通過Trinder反應試驗我們統(tǒng)計出:
實驗結果表明色原底物ALPS, TOOS, TODB,TOPS的顯色產物摩爾吸光度較高,這意味著顏色反應的靈敏度較高,既可以進行一些血清中很微量的待測項的測定。
而色原MAOS與MADB的吸收波長較高,達到了630nm,受血清或其它樣本中其他物質干擾更小,可以針對需要高精確值的檢測項。
另外在顯色產物褪色情況方面,TOOS, ADOS,DAOS所形成的顏色反應產物吸光度隨時間變化不大,即顏色反應產物穩(wěn)定,不易褪色。但MAOS的產物則褪色明顯,檢測時需及時觀測數據。
可以將不同Trinder’s試劑的差異總結如下:
1,TOOS在吸收波長,顏色反應強度以及褪色方面均有較好的表現(xiàn),所以TOOS最常用。
2,當然,對于特定待測項,其含量極其微量,那么就需要用到ALPS,TODB 。
3,又如有的待測項在550nm~600nm,會有干擾,那就可以選擇MADB,MAOS。
在實際應用中,有些指標檢測對應的新型Trinder’s試劑區(qū)別并不大,可以替換使用,所以可以看到不同公司的診斷原料或試劑盒中檢測同一項生化指標時運用了不同的色原底物。德晟開發(fā)的十種色原底物可以滿足不同公司需求。