吖啶酯化學發(fā)光試劑是體外診斷領域常用的一種檢測試劑,它的化學發(fā)光不像HRP或ALP的底物,可直接化學發(fā)光,那么吖啶酯的化學發(fā)光與熒光免疫中的熒光有什么區(qū)別呢?
化學發(fā)光是物質(zhì)產(chǎn)生化學反應時產(chǎn)物由激發(fā)態(tài)回到基態(tài)的一種分子發(fā)光現(xiàn)象,其實分子發(fā)光有化學發(fā)光、熒光、磷光三種類型,它們的發(fā)光原理是不同的:
自然界中的化學發(fā)光
化學發(fā)光的原理
如德晟吖啶酯與過氧化氫兩種物質(zhì)發(fā)生化學反應生成另一種吖啶酯衍生物,反應釋放的能量被這種產(chǎn)物的分子吸收并躍遷至激發(fā)態(tài),處于激發(fā)的分子再回到基態(tài)的過程中產(chǎn)生光輻射。這里產(chǎn)物是發(fā)光體,此過程中由于發(fā)光產(chǎn)物直接參與反應,故稱直接化學發(fā)光。魯米諾的發(fā)光原理也是類似的,不過需要HRP或POD的催化,故稱為酶促化學發(fā)光。
熒光的原理
光照射到某些原子時,光的能量使原子核周圍的一些電子由原來的軌道躍遷到了能量更高的軌道,即從基態(tài)躍遷到第一激發(fā)單線態(tài)或第二激發(fā)單線態(tài)等。第一激發(fā)單線態(tài)或第二激發(fā)單線態(tài)等是不穩(wěn)定的,所以會恢復基態(tài),當電子由第一激發(fā)單線態(tài)恢復到基態(tài)時,能量會以光的形式釋放,所以產(chǎn)生熒光。
磷光的原理
當某種常溫物質(zhì)經(jīng)某種波長的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能后進入激發(fā)態(tài)(通常具有和基態(tài)不同的自旋多重度),然后緩慢地退激發(fā)并發(fā)出比入射光的波長長的出射光。
看到這里,很多人可能還是不會區(qū)分,但是沒有關系。舉例來說,螢火蟲的發(fā)光就屬于生物發(fā)光或化學發(fā)光,磷火或“鬼火”也是化學發(fā)光,熒光棒也是化學發(fā)光;紫外線照射人民幣防偽標識發(fā)光的是熒光;夜光筆、夜光手表這類屬于磷光。在日常生活中,人們通常廣義地把各種微弱的光亮都稱為熒光。
在分析檢測領域,化學發(fā)光免疫和熒光免疫就是兩種不同的檢測方法了,需要加以區(qū)別。德晟的魯米諾和吖啶酯都屬于化學發(fā)光試劑,和熒光免疫的試劑是不同體系的試劑。