干貨分享！hepes緩沖液配比詳解
在日常實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中使用較為頻繁的就是緩沖液，但因其類型較多，像常見的有：磷酸鹽、硼酸鹽、Tris、HEPES等溶液，通常會(huì)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求來(lái)進(jìn)行選擇。這主要是因?yàn)榫彌_液的選擇錯(cuò)誤會(huì)造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的偏差，如使用pH值相同的類型溶液，但因?yàn)槟撤N離子導(dǎo)致沉淀現(xiàn)象，就可能使實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生不需要的化學(xué)反應(yīng)，影響實(shí)驗(yàn)操作。由于hepes溶液近期使用操作誤區(qū)較多，所以下面就詳細(xì)給大家介紹一下它。
作為一種非離子型的兩性溶液，其pH值在7.2-7.4之間，是大多數(shù)實(shí)驗(yàn)中的選擇溶液，例如用于生化診斷試劑盒和細(xì)胞培養(yǎng)液中。尤其是在開放式細(xì)胞培養(yǎng)中它可以較為穩(wěn)定的維持pH值，并對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用。具體的配比詳解如下：
1、以配制500毫升的HEPES，PH等于7的儲(chǔ)備溶液為例。首先準(zhǔn)備119g的粉末溶解到400毫升的去離子水中，然后加入0.5-1M的氫氧化鈉溶液，將其調(diào)節(jié)至所需要的pH值，再加入去離子水定容，在4度條件下保存即可。
2、如果是要在HEPES中加入少量鹽，以500毫升為例，其配比方法為準(zhǔn)備HEPES溶液6.5g,氯化鈉8g,磷酸氫二鈉七水合物0.19g,然后使用0.5M的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值，進(jìn)行定容。
3、如果是2×HEPES緩沖鹽溶液的配制，需按照氯化鈉1.6g,氯化鉀0.074g，磷酸氫二鈉二水合物0.027g和1g的HEPES充分溶解至90毫升的去離子水中，然后用0.5M氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)至所需pH值，再用蒸餾水定容即可。
4、100 x HEPES貯存液配比為取23g的HEPES溶于90ml雙蒸水中，然后添加1M氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值到7.5-8.0，加去離子水定容至100ml，過(guò)濾除菌，在4℃或-20℃保存下保存即可。
上述整理的配比方法較為普遍，但具體使用時(shí)要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行靈活配比。德晟作為生物緩沖液的生產(chǎn)商，所涉及的產(chǎn)品有Tris、Caps、Bicine、Mops、Hepes等多種，可完全滿足客戶實(shí)驗(yàn)要求，提供一站式采購(gòu)，不僅節(jié)約時(shí)間，還降低了采購(gòu)成本。同時(shí)為保證產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題，質(zhì)檢人員對(duì)每批產(chǎn)品重復(fù)檢測(cè)，使用時(shí)不會(huì)產(chǎn)生干擾檢測(cè)結(jié)果的現(xiàn)象。如果您有意向，歡迎點(diǎn)擊咨詢購(gòu)買！