4-羥乙基哌嗪乙磺酸HEPES在細(xì)胞培養(yǎng)基中的作用
細(xì)胞培養(yǎng)基是給細(xì)胞提供營養(yǎng)促進(jìn)生長的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是培養(yǎng)細(xì)胞的重要的生長環(huán)境因素，細(xì)胞培養(yǎng)基中通常含有PH調(diào)整液、平衡鹽水、細(xì)胞消化液、抗生素溶液等。那什么情況下細(xì)胞培養(yǎng)基中需要添加HEPES呢？它又起到什么作用？我們一起來了解下。
1、HEPES在細(xì)胞培養(yǎng)基中的作用
大家都知道HEPES是一種生物緩沖劑，所以它在細(xì)胞培養(yǎng)基的重要組成因素中當(dāng)然是PH調(diào)整液了。因?yàn)榕囵B(yǎng)基中需要保持足夠的碳酸氫鹽以達(dá)到獲取營養(yǎng)目的，這就需要HEPES提供額外的緩沖能力，HEPES緩沖介質(zhì)可抵抗急劇的pH變化，但不能完全阻止pH的變化。值得注意的是，在使用HEPES緩沖劑時一定配置成合適的使用濃度，否則濃度過高會引發(fā)細(xì)胞毒性，影響整個實(shí)驗(yàn)。
可以使用別的緩沖劑代替HEPES嗎？
雖然市面上其它的生物緩沖劑種類很多，但是由于多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)的生長環(huán)境PH區(qū)間值保持在7.2-7.4之間比較好，而這又剛好在HEPES緩沖劑的有效緩沖范圍之內(nèi)，所以與其它緩沖劑相比，HEPES無疑是具有優(yōu)勢的。但是根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需求，也可以酌情選擇別的緩沖液使用。
上述對HEPES在細(xì)胞培養(yǎng)基中的作用做了詳細(xì)說明。HEPES除了用于細(xì)胞培養(yǎng)之外，還廣泛用于組織培養(yǎng)，蛋白質(zhì)純化和提取，免疫沉淀，細(xì)胞裂解，活細(xì)胞成像和其他生物/生化研究等。
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