Tris、Tris-base、TRIS堿的區(qū)別?
這個(gè)問(wèn)題一直是很多的科研工作者的困擾,Tris學(xué)名叫,它和Tris堿、Tris base,兩者是同一種物質(zhì)。中文品名為三羥甲基氨基甲烷;他還有其他別名:氨基丁三醇、緩血酸胺,是一種白色結(jié)晶或粉末。溶于乙醇和水,微溶于乙酸乙酯、苯,不溶于乙醚、四氯化碳,對(duì)銅、鋁有腐蝕作用,有刺激性的化學(xué)物質(zhì)。
Tris與Tris-HCL之間有什么聯(lián)系?
1. 簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是,Tris是堿性溶液,而L是酸性溶液。請(qǐng)記住,緩沖液用于抵抗pH的變化,即使沒(méi)有緩沖液,即使是少量的強(qiáng)酸或強(qiáng)堿也可能會(huì)顯著改變環(huán)境的pH值。因此,在Tris-HCL或Tris之間進(jìn)行選擇的原因也取決于要使用的緩沖液實(shí)現(xiàn)的目標(biāo)。
2. Tris-HCl是用三羥甲基氨基甲烷和鹽酸配置,然后可以調(diào)節(jié)PH,各PH段都有用到,實(shí)驗(yàn)做蛋白實(shí)驗(yàn)用的較多的是PH6.8和PH8.8的,一般實(shí)驗(yàn)室用這個(gè)也是在蛋白質(zhì)、DNA、RNA實(shí)驗(yàn)中.Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,還有許多重要用途。
3. 有時(shí)候TRIS和TRIS-HCL也會(huì)聯(lián)用,如果提取動(dòng)物的組織蛋白,開(kāi)始可能需要用冷PBS(N內(nèi)含TRIS)緩沖液清洗一下,然后研磨提取蛋白,提取蛋白的裂解液中可能就有Tris-HCl作為緩沖液,此時(shí)就不適合用PBS.
如何制備Tris-HCl緩沖液
使用以下簡(jiǎn)單步驟,即可在此pH范圍內(nèi)以任何摩爾濃度制備任何Tris-HCl緩沖液
1)計(jì)算Tris Base的摩爾數(shù):摩爾/升* L =需要的摩爾數(shù)
2)計(jì)算Tris Base的質(zhì)量:用摩爾數(shù)乘以確定要稱重的Tris堿的質(zhì)量.Tris的分子量(121.14 g / mol),需要的摩爾數(shù)* g / mol = g
3)將Tris堿溶解在水中:將所需質(zhì)量的Tris溶解在一定體積的去離子水中,大約需要制備的緩沖液體積的1/3。
4)調(diào)節(jié)pH值:使用pH計(jì),用1M鹽酸(HCl)滴定Tris溶液,直到達(dá)到正確的pH值為止。
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