是膽固醇降解代謝過(guò)程中的關(guān)鍵酶。它依賴(lài)于輔酶 FAD，能催化膽固醇氧化和異構(gòu)化生成膽甾-4-烯-3-酮，同時(shí)產(chǎn)生H2O2。近些年來(lái)，膽固醇氧化酶在不同領(lǐng)域都發(fā)揮著它的價(jià)值。我?guī)Т蠹伊私獾氖顷P(guān)于膽固醇氧化酶在臨床檢測(cè)中的一些用途。

膽固醇氧化酶可以用來(lái)檢測(cè)多種樣品中的膽固醇含量：

1. 全血清和其血清；

2. 低密度脂蛋白和高密度脂蛋白；

3. 紅細(xì)胞膜、其他細(xì)胞膜；

4. 膽結(jié)石和人體膽汁。

1973 年，Richmond 發(fā)現(xiàn)可以通過(guò)測(cè)定諾卡氏菌中的膽固醇氧化酶催化膽固醇氧化生成的H2O2的量來(lái)測(cè)定血清中膽固醇水平。H2O2可以與四價(jià)鈦和二甲酚橙反應(yīng)生成在550 nm有吸收的有色物質(zhì)。后來(lái)又通過(guò)測(cè)定膽固醇氧化酶作用下生成的膽甾-4-烯-3-酮（在 240 nm 有最大吸收）的量測(cè)定血清膽固醇。

由于人體血漿中70%的膽固醇是以酯化的形式存在的，膽固醇酯酶也被應(yīng)用到血漿總膽固醇的測(cè)定中。膽固醇酯酶水解膽固醇酯生成游離膽固醇；膽固醇氧化酶作用于膽固醇生成膽甾酮和過(guò)氧化氫;在辣根過(guò)氧化物酶的作用下，過(guò)氧化氫能將 4-氨基-安替比林和苯酚轉(zhuǎn)化為紅色的亞醌類(lèi)化合物，該化合物在500 nm處有最大吸收峰，通過(guò)檢測(cè)紫外吸收強(qiáng)度就能夠測(cè)定膽固醇的含量。這個(gè)方法具有簡(jiǎn)單、干擾少、重現(xiàn)性好的優(yōu)點(diǎn)，通常將膽固醇氧化酶、膽固醇酯酶和過(guò)氧化氫酶混合在一起，制成測(cè)量血清總膽固醇含量的診斷試劑盒，用于臨床檢驗(yàn)中。但是，由于色素的干擾，膽汁中的膽固醇不能用此比色法檢測(cè)，而要通過(guò)電化學(xué)方法測(cè)定膽固醇氧化所消耗的氧氣量。

為了提高膽固醇利用率和穩(wěn)定性，常將膽固醇固定化，制成傳感器的形式。通過(guò)測(cè)定氫敏染料的熒光度變化檢測(cè)膽固醇水平。這個(gè)方法的分析范圍在0.2-3 mM，在7-12 min 能夠得到穩(wěn)定信號(hào)。

之后，又制作了一個(gè)基于氧氣的電化學(xué)還原的生物傳感器，它采用了雙層鍍膜的方式，將膽固醇氧化酶固定于尼龍網(wǎng)上，置于氧探頭膜之上或者過(guò)氧化氫檢測(cè)器的醋酸纖維素膜之上，上方再覆蓋一層聚碳酸脂膜。在流動(dòng)注射系統(tǒng)中，在0.5-5 mM 的膽固醇濃度范圍內(nèi)，這個(gè)檢測(cè)器能夠迅速給出準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好的結(jié)果，且不會(huì)受有機(jī)干擾的影響。