全稱三羥甲基氨基甲烷，屬于一種常見的生物緩沖劑。生物緩沖液常用于生物化學(xué)研究實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，具有極為重要的意義，是一類能夠抵制外界少量強(qiáng)酸和強(qiáng)堿的影響，維持PH值基本不變的調(diào)節(jié)液。TRIS不僅被廣泛用于核酸和蛋白質(zhì)的溶劑，蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一，還可參與生產(chǎn)多種化工、農(nóng)藥、醫(yī)藥產(chǎn)品，是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的重要中間物。另外TRIS還能在植物蛋白質(zhì)提取中的應(yīng)用，有多少人知道呢？

 蛋白質(zhì)組學(xué)即從蛋白質(zhì)組的水平進(jìn)一步認(rèn)識(shí)生命活動(dòng)的機(jī)理和疾病發(fā)生的分子機(jī)制，而在蛋白質(zhì)組學(xué)的研究中，蛋白質(zhì)的提取是最基礎(chǔ)也最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)之一，TRIS是植物蛋白質(zhì)提取中常用的試劑，方法包括TRIS-HCl法、酚法、TRIS-丙酮-酚法。本文將對(duì)這幾種方法進(jìn)行分析總結(jié)。

TRIS-HCl法：

TRIS-HCl法提取的蛋白圖譜效果比用TCA丙酮法提取的效果好。TCA丙酮法所提取蛋白在小分子量區(qū)域分布不均勻，蛋白點(diǎn)不清晰，水平條紋與豎直條紋較為嚴(yán)重，而TRIS-HCl法克服了上述缺點(diǎn)，并分離出TCA丙酮法所不易分離出的酸性蛋白，除分離到較多的中等分子量的蛋白質(zhì)外，還能得到很多的高分子量和低分子量蛋白質(zhì)。

酚法：

酚法利用了TRIS-飽和酚的特性：酚是蛋白質(zhì)的良好溶劑，在樣品制備過程中，蛋白質(zhì)和脂類溶于酚相，鹽、核酸、多酚和多糖等可溶性物質(zhì)進(jìn)入水相；通過增加離心力和離心時(shí)間，可以盡可能地把密度大的糖離至上清液的上層；酚相中的蛋白質(zhì)通過乙酸銨的甲醇溶液沉淀，再用冷丙酮多次清洗蛋白，可以去除色素和銨離子等雜質(zhì)。

TRIS-丙酮-酚法：

將TCA丙酮法與酚法結(jié)合后用于提取蛋白，融合了TCA丙酮沉淀法和酚法的優(yōu)點(diǎn)。先用含有乙酸銨的甲醇溶液清洗殘留的TCA并提升溶液的pH到7.0以上，再使用酚和SDS的混合物來溶解蛋白。酚-SDS聯(lián)合提取比酚、SDS緩沖液?jiǎn)为?dú)提取更有效。TRIS-丙酮-酚法在很多植物的蛋白提取上都取得了非常好的效果，而且電泳圖譜背景和條帶都很清晰，蛋白質(zhì)點(diǎn)多，可廣泛應(yīng)用于植物的葉片和果實(shí)中蛋白質(zhì)的提取。

對(duì)于植物蛋白的提取，不僅樣品多樣，而且每種植物所含有的成分也不同，其中的干擾因素也多，所以沒有一種方法可以適用于各種樣品。在實(shí)驗(yàn)中，首先要明確目的，是獲得一種目標(biāo)蛋白還是獲得所有蛋白，然后再根據(jù)樣品特點(diǎn)來選擇提取方法，進(jìn)行摸索優(yōu)化。

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